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            CO2光照培養箱試驗的成功關鍵在于細節要把控好

            點擊次數:768發布時間:2021-08-13
               CO2光照培養箱是在常規培養的基礎上進行的改進,主要是通過添加CO2來滿足微生物培養所需的環境。主要用于組織培養和某些特殊微生物的培養。根據實驗要求,將二氧化碳培養框分為水套式和氣套式。
              小心培養的細胞就這樣死掉了,是個很心痛的事情。其實影響細胞存活率的原因有很多,有時候并不是培養箱本身出了問題,我們的許多操作對細胞培養的結果也是有很大影響的,今天為大家分享一下使用CO2光照培養箱對細胞進行培養時應該注意的問題:
              1.確保所有實驗室材料都無菌
              交叉污染是細胞培養的大敵。即使是輕微的污染,也可能毀了幾個星期的成果。因培養箱內溫暖潮濕,真菌易生長,因此須注意定期清潔。此外,在將培養瓶、移液管及其他的相關物品放入超凈臺之前,應用酒精擦拭干凈,以避免污染。
              2.小心處理您的培養物
              細胞培養的脆弱性怎么強調也不為過。劇烈搖晃,或連續的溫度波動可能會對生長產生不利的影響。確保培養箱是水平的,溫度均一,且遠離電動儀器。此外,盡量避免一次處理多個細胞系,因為它可能會影響細胞的基因型和表型。您還應定期完成STR圖譜分析,以確認細胞系的身份。
              3.在使用前正確解凍細胞
              盡管解凍看起來是個簡單的步驟,但須操作得當,以免傷害細胞。長時間暴露在高溫條件下會使細胞無法鋪板。因此,凍存管應當在37°C水浴中放置2分鐘,然后用條件培養基稀釋,以避免造成直接傷害。
              4.使用對數生長期的細胞
              細胞培養過程共有3個階段:停滯期、對數期和平臺期,分別代表了低細胞生長、高細胞生長和無細胞生長。有活力的細胞是健康的,快速分裂的,在對數期以70-80%的匯合度存在。
              5.利用細胞的代謝特性來優化培養基
              分析使用過的培養基,有助于鑒定必要成分的代謝速率,包括氨基酸和維生素。從細胞生長階段和蛋白生產階段收集到的動態代謝圖譜可用來平衡基礎培養基和添加培養基,指導培養基的重點,有助于蛋白質的生產。
              此外,在使用CO2光照培養箱的過程中應關好培養箱的門,以免氣體外泄,影響試驗效果,制冷系統停止工作后,用軟布擦凈工作腔和玻璃觀察窗;每次停機前,各控制開關均應處于非工作狀態才切斷電源,只有做好這些小細節,才能成功的做好實驗!
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